一、动态光散射仪操作前准备
环境要求
选择平稳、干燥、温度适宜的场所安装仪器，确保仪器底部与地面平稳接触，光路垂直地面，且仪器底部离地面至少50cm。
避免空气流动、震动及强电磁干扰源(如大型电机、高频设备)，确保测量环境稳定。
样品制备
分散性：样品需均匀分散在液体介质中，避免团聚或沉淀。
浓度控制：
蛋白质样品：14kDa蛋白浓度建议1mg/ml，28kDa蛋白浓度建议0.5mg/ml。
其他样品：根据粒径大小调整浓度，避免多重光散射(浓度过高)或信号过弱(浓度过低)。
除气泡：样品需12,000rpm离心10分钟，取上清液，避免气泡影响测量。
样品量：样品池容量约14μl，建议准备20μl样品以确保填满。
仪器检查
检查电源、连接线、光路系统是否正常，确保激光器、探测器、温控模块等部件连接牢固。
预热仪器10-15分钟，待系统稳定后进行测量。
二、操作步骤
开机与软件连接
接通电源，依次打开主机、温控模块及计算机电源。
运行测量软件(如Zetasizer、IRSoft等)，点击“Connect”或“Hardware”建立软件与仪器的连接，确认连接成功后图标变绿。
样品加载
用水冲洗微量取液器和样品池，避免污染。
使用微量取液器将样品缓慢注入样品池，避免针头刮碰池底或侧壁。
将样品池放入样品室，确保箭头朝向自己，盖上样品室盖子。
参数设置
仪器参数：
激光强度：根据样品浓度调整(高浓度样品需降低功率以避免信号过载)。
温度：设置测量温度(如25℃)，恒温120秒使样品温度稳定。
溶剂参数：
输入溶剂的折光率(RI)和粘度(Viscosity)，参数随温度变化需实时更新。
样品参数：
输入样品的折光率(RI)和吸收率(Absorption)，如蛋白质样品需选择“Material”类型并输入对应参数。
测量参数：
测量时间：根据样品稳定性设置(如连续测量3次，每次120秒)。
散射角度：通常选择90°(小颗粒)或173°(大颗粒)。
数据过滤：设置偏差范围(如Baseline=1±0.003)，过滤异常数据。
数据采集
点击“Start”或“Measure”开始测量，仪器自动记录散射光强度随时间的变化。
测量过程中避免触碰仪器或样品池，防止光路偏移。
红色数据为超出设定范围的值，分析时不采用。
数据分析
粒径分布：软件自动计算流体力学半径(Rh)及多分散性指数(PDI)，生成粒径分布图(如对数正态分布、MSD多尺寸分布)。
相关性函数：分析光强波动与时间的关系，评估样品均一性。
数据导出：保存为CSV、Excel或PDF格式，便于进一步处理或报告生成。
三、动态光散射仪操作后维护
清洁与保养
测量完成后，立即用水冲洗样品池，吹干后存放，避免残留样品污染。
定期清洁光学元件(如激光窗口、探测器)，使用无尘布或专用清洗剂。
检查仪器内部是否有杂物或尘埃，保持光路系统干燥管吸潮状态(如吸潮需烘干再生)。
校准与验证
定期使用标准粒子(如聚苯乙烯乳胶)进行校准，确保测量准确性。
检查仪器连接是否正常，各部件安装是否牢固，进行电磁兼容性测试。
存储与安全
仪器不使用时，存放在干燥、通风、无腐蚀性气体的环境中，断开电源并盖上防尘罩。
避免与危险化学品接触，防止安全事故。
