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Calypso生物大分子相互作用分析仪工作原理

发布时间:2021-01-18      点击次数:365
  Calypso生物大分子相互作用分析仪是一个以组分-梯度多角度光散射(CG-MALLS)为基础的生物大分子间相互作用分析系统,可以快速、自动、无损、定量的表征大分子间的相互作用,具有重复性高、灵敏度高及无需样品修饰等诸多优点。该系统可以分析分子间的特异性及非特异性相互作用,聚集或解离的动力学等。对于分子间的特异性相互作用,Calypso可以测定其自聚作用及不同样品分子间的异聚作用,得到平衡解离常数Kd及反应的化学计量数。对于非特异性相互作用,可以测定其维力系数,并判断分子间的作用力及强度。此外,Calypso还可以测定反应的动力学,样品的重均分子量及均方根半径等重要分子信息。Calypso分析系统无需对样品进行修饰(荧光标记、固定化等),且在溶液环境中测量,因此可以大程度的保证样品的天然状态,从而得到其他技术难以得到的结果,真实的表征生物大分子间的相互作用,样品方便回收。
 
  Calypso生物大分子相互作用分析仪工作原理:组分-梯度多角度光散射(CG-MALS)是新的分析技术之一,利用分子量的变化测定分子间的相互作用。溶液中大分子的散射光强依赖于物质的浓度C和重均分子量Mw,分子间发生复合,Mw则增加。例如,若所有的蛋白质分子以二聚体形式出现,则散射光强也会增倍。对于可逆的聚集,蛋白与单体蛋白复合的比例会达到一个平衡值,这个值依赖于每种蛋白初始的浓度和缓冲液的条件。不同的组成和浓度会导致Mw不同。通过分析一系列不同组成和浓度的光散射结果,可以确定所发生的聚集形式、各自的结合亲和力Ka、结合和解离平衡常数。手动配制比例及测量是一项繁琐、费时间且容易产生操作误差的工作,Calypso系统通过自动化的过程克服了CG-MALS手动操作的困难,将样品配制、输送及数据的采集和分析集合于一体,完美的保证了实验的重复性,并解决了人工配制样品时引入操作误差的问题。
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